PCR(immunoPCR,Im-PCR )是利用抗原抗体反应特异性和PCR扩增反应的极高灵敏度建立的微量抗原检测技术。
PCR(immunoPCR,Im-PCR )是利用抗原抗体反应特异性和PCR扩增反应的极高灵敏度建立的微量抗原检测技术。
PCR的优点是综合了固相免疫反应和PCR两者的特征。 因此,在保证免疫测定特异性的同时,具有极高的检测灵敏度。 免疫PCR的基本原理与常规标记免疫技术相似,但用于免疫PCR的抗原或抗体标记物为DNA,固相免疫结合反应完成后,采用PCR技术扩增标记DNA,最后通过检测PCR产物对抗原或抗体进行定性或定量分析。
标记的化合物与检测对象的特异性反应形成多元复合物,与未结合的标记物分离后,可以用较简单的方法鉴定和检测检测对象。
url标记检测广泛用于标记物、体内代谢过程及其代谢产物的研究。
酶标记免疫技术是抗原、抗体或半抗原与过氧化物酶共价结合复合物,该复合物保留免疫反应物的决定簇;
也就是说,由于是免疫反应的特异性,不影响酶的催化活性,因此可以从免疫学反应后酶与底物反应生成的产物中鉴定和定量被检测化合物。
有以下两种技术。
第一个是生物学的。 它利用特定抗体的反应,筛选给定的有机物质;
二是物理学。 将带有放射性的原子导入有机物质,并在这些有机物质上做记号。
表面增强拉曼光谱(SERS )是一种建立在拉曼散射基础上的分析表征技术。 由于其谱带窄、分辨率高、能猝灭荧光、水干扰小、灵敏度高等优点,SERS广泛应用于表面科学、材料科学和生物医学等领域
SERS是一种无损、无标记、指纹分析技术,能够全面反映每个细胞成分信息。 也就是说,是“拉曼成像”。 SERS检测技术依赖于SERS增感基底的设计。
金标准法是国际上比较先进的体外诊断方法,近年来,金标准法(胶体金法)在各种生物学研究中被广泛使用,临床使用的免疫印迹技术几乎都是使用其标记,同时还有流式细胞术、电镜、免疫、分子生物学、甚至
它具有以下特点:
)1)灵敏度高
)2)特异性强
)3)高速
)4)简便
)5)准确的323131愚人节2363134313431303231363533 e 78988 e69 d 83313332636362率较高。
1971年Faulk和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到越来越广泛的应用。 目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法(immunochromatogra-phy )和快速免疫金渗滤法(dot-immuogoldfiltrationasaydigfa ),与HBsAg、HCG抗双链DDD
免疫胶体金技术的基本原理:
胶体金是指氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗坏血酸、柠檬酸钠、单宁酸等还原剂的作用下,聚合成一定大小的金粒子,在静电作用下形成稳定的胶体状态,形成带负电的疏水性胶体溶液,形成带负电的胶体金胶体金在弱碱环境下带负电荷,与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的键,该键为静电键,因此不影响蛋白质的生物特性。
胶体金除与蛋白质结合外,还可以与SPA、PHA、ConA等许多其他生物大分子结合。 基于胶体金的物理性状,如高电子密度、粒子大小、形状和颜色反应、结合物免疫和生物学特性,胶体金广泛应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。
胶体金标记实质上是蛋白质等高分子吸附在胶体金粒子表面的包复过程。 吸附机制可能是胶体金粒子表面的负电荷和蛋白质的正电荷基团通过静电吸附牢固结合。 通过采用还原法,可以很容易地从氯金酸中制备各种粒径,即不同颜色的胶体金颗粒。 该球形颗粒对蛋白质有较强的吸附功能,能与葡萄球菌a蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽络合物等非共价结合,成为基础研究和临床实验中非常有用的工具。
文章来源:《标记免疫分析与临床》 网址: http://www.bjmyfxylc.cn/zonghexinwen/2022/1206/686.html
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